【생물학】 투과전자현미경 사용법

투과전자현미경 사용법

 

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1. 시료장착

2. Holder 장착

3. Filament 인가

4. 시료 찾기

5. 배율, 밝기 조정

6. 초점 작업

7. 이미지 획득

8. 작업 종료

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1. 시료장착

⑴ Holder의 claw 부분을 이쑤시개를 사용하여 연다.

⑵ 루비(빨간색)가 있는 쪽을 1번, 손잡이 쪽을 2번으로 하여 시료를 놓는다.

⑶ grid는 앞면이 하늘을 보게끔 하여 놓고, O-ring 안쪽 부분은 손으로 잡지 않도록 주의한다.

 

 

2. Holder 장착

⑴ Holder의 guide pin을 guide groove에 맞춰 TEM에 가볍게 장착한다.

⑵ 손바닥으로 Holder를 살포시 밀어준다. 오른쪽 상단에 불이 들어오는 것을 확인하고 손을 뗀다.

⑶ 오른쪽 상단의 불이 꺼졌다 켜졌다 반복하도록 둔다. (2회 이상)

⑷ 2번 반복 후 다시 불이 꺼지면 Holder를 90 ℃로 천천히 돌려 넣는다.

⑸ 불은 약 5초간 꺼져 있으며, 불이 켜진 상태에서 holder를 돌리면 진공이 깨지게 되므로 주의해야 한다.

 

 

3. Filament 인가

⑴ HT 버튼이 켜져 있는지, Beam current가 52~54로 안정되어 있는지 확인한다.

⑵ FIL 버튼을 누르고 Beam current가 61~64로 안정되는지, 형광판이 불이 들어오는지 확인한다.

⑶ 형광판에 Beam이 안 보이는 경우

① grid 격자에 beam이 가려진 경우 : Specimen Shifting Knobs을 좌우로 돌려 본다.

② Brightness가 많이 돌려져 있는 경우 : 만약 배율이 높다면 배율을 낮춰본다.

③ 카메라가 삽입되어 있는 경우 : 카메라는 빼준다.

④ Filament가 끊어진 경우 : 교체해야 한다. (확인 : FIL 인가 후 Beam current 값이 52 ~ 54이다.)

 

 

4. 시료 찾기

⑴ Specimen Shifting Knobs를 이용하여 원하는 시료를 찾는다. 각각 X, Y 방향으로 이동할 수 있다.

⑵ 2번 시료로 옮기기 : 왼쪽 Specimen Shifting Knobs 위쪽에 조절 버튼을 조절한다.

 

 

5. 배율, 밝기 조정

⑴ 배율 : 우측 panel에 있는 MAG knob를 좌우로 선택하여 배율을 조정한다.

⑵ 밝기 : 스크린이 어두울 경우, 좌측 panel의 brightness knob를 조절한다.

 

 

6. 초점 작업

⑴ 오른쪽 Specimen Shifting Knobs 아래쪽 손잡이를 이용해 small screen을 내린다.

⑵ 기기에 장착된 대안렌즈의 미간과 초점을 실험자에 맞도록 조절한다.

⑶ 시료를 small screen 안으로 이동시키고 우측 panel의 focus Knob를 이용해 초점을 맞춘다.

 

 

7. 이미지 획득

⑴ CCD 카메라 버튼을 기기쪽으로 돌려 카메라를 넣는다.

⑵ dm3 프로그램을 가동하고, 프로그램 화면 우측의 Camera View 창에서 smart view를 클릭한다.

⑶ 프로그램 화면 우측의 intensity 창에서 상태표시 bar가 녹색 영역에 있도록 Brightness Knobs로 조절한다.

⑷ 프로그램 화면 우측의 Camera acquire 창에서 Start acquire를 클릭하여 이미지를 획득한다. Start acquire를 누르면 배율을 입력하라는 경고창이 나오는데, TEM 모니터에 적힌 최종배율을 입력한다. 입력된 배율에 따라 scale bar가 정해지므로 주의하여 입력한다.

⑸ Ctrl+S를 눌러 dm3 파일로 저장하고, Ctrl+G를 눌러 TIF 파일로 또 한 번 저장한다. 저장 폴더는 USER이며, 개인 폴더명은 이니셜+날짜로 매일 폴더를 만들어 저장한다. (파일은 3개월간 보관한다.)

 

 

8. 작업 종료

⑴ Camera View 종료 : 프로그램 우측의 Camera View 창에서 Stop view를 눌러 Camera View 화면을 정지시킨다.

⑵ CCD 카메라 종료 : Camera View 화면이 정지된 후, CCD 카메라 버튼을 기기 반대방향으로 돌려 카메라를 뺀다.

⑶ Filament 종료 : FIL을 눌러 Filament를 끈다.

⑷ Holder 분리 : 기기반대방향으로 수평하게 당긴 후 사용자의 몸 쪽으로 90도 돌린다. 손을 잠시 놓았다 손의 방향을 새로 잡고 기기반대 방향으로 수평하게 잡아당긴다.

 

입력 : 2019.03.22 20:05